01.血清

将采集的全血置于4℃冰箱中过夜。然后以1000-3000 rpm离心10分钟。取上清液，立即检测或将样本置于-20℃/-80℃（1-3个月）保存。

02.血浆

取已加入EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂的血浆。充分混匀。以1000-3000 rpm离心10分钟。取上清液立即检测或将样本置于-20℃/-80℃（1-3个月）保存。

03.组织匀浆

取已在0.01 M PBS中洗涤过的组织切片，然后按1 g组织比5-10 mL的比例加入组织蛋白提取试剂，在冰浴中混匀。充分匀浆后，以5000-10000 rpm离心10分钟。取上清液立即检测，或将样本置于-20℃/-80℃（1-3个月）保存。

04.细胞培养

以1000-3000 rpm离心10分钟。取上清液立即检测，或将样本置于-20℃/-80℃（1-3个月）保存。

05.尿液、腹水、脑脊液等

以1000-3000 rpm离心10分钟。取上清液立即检测，或将样本置于-20℃/-80℃（1-3个月）保存。

采血管应无热原和无内毒素。 不建议使用溶血或高脂血症标本。 样本最终应呈现澄清且基本透明。所有颗粒物均应通过离心去除。 如果采集的样本不立即使用，应按单次使用量分装，并在-20/-80℃下冷冻保存，务必避免反复冻融。 为使样本在标准曲线范围内获得适当的检测分辨率，通常需要对样本进行稀释优化。始终建议在批量检测样本之前进行预实验，以确定是否需要对样本进行优化稀释。 建议采集足量样本以进行多次检测，因为有时部分用户可能会遇到一些问题而导致数据丢失。 在采集/处理样本时，务必穿戴防护外套（如戴手套、穿防护服、佩戴口罩/呼吸器等），并了解处理标本所涉及的所有潜在风险。 样本处理应在维护良好的生物安全柜内进行。

建议用户充分了解其样本预期浓度的大致范围。我们建议查阅学术文献中类似样本浓度的参考文献，然后据此考虑对样本进行适当稀释。 请提前20分钟将ELISA试剂盒从冰箱中取出，待其恢复至室温后即可开始检测。 用双蒸水稀释浓缩洗涤缓冲液（1:25）。未用完的部分放回盒中。 标准品：向冻干标准品瓶中加入1.0 mL标准品稀释液，静置30分钟。待标准品完全溶解后，轻轻混匀，并在管上贴上标签。 标准品稀释步骤：取7支洁净试管，分别标注其预期浓度（STD2、STD3、STD4、STD5、STD6、STD7、STD8）。每管加入300 μL标准品稀释液。从复溶后的STD1中吸取300 μL加入标注为STD2的管中，混匀。然后从STD2管中吸取300 μL加入STD3管中，混匀。重复此操作直至STD7管。STD8管中的标准品稀释液作为阴性对照。 复溶后的标准品母液不可重复使用。 生物素化抗体：根据拟检测的孔数取出相应体积的生物素化抗体溶液，按1:100的比例用抗体稀释液稀释。应提前30分钟配制，我们绝对建议不要重复用于其他检测。 酶结合物：根据拟检测的孔数取出相应量的酶结合物溶液，按1:100的比例用酶稀释液稀释。应提前30分钟配制，我们绝对建议不要重复用于其他检测。 显色剂：提前30分钟配制显色剂溶液，将显色剂A和显色剂B按9:1的体积比混合。

以标准品浓度值为X坐标，OD读数为Y坐标。也可以取对数，双对数或者半对数绘图。用平滑线连接标准品各坐标点。将样本OD值代入标准曲线方程，即可求出样本浓度。建议使用专业曲线软件（如curve expert 1.3）对结果进行分析和计算。